-
jak se vyjadřuje aktivita enzymů?
- pomocí smluvených jednotek:
- ● dříve IU (International Unit) = počet mikromolů přeměněného substrátu za minutu
- ● dnes kat (katal) = počet molů přeměněného substrátu za sekundu
-
aktivita enzymu je definována jako...
rychlost katalyzované rce
-
definuj specifickou aktivitu enzymu+jednotky
aktivita enzymu vztažená na množství proteinu v jednotce objemu (např. kat/mg v 1ml)
-
definuj Číslo přeměny enzymu
počet molů substrátu přeměněných jedním molem enzymu za 1 sekundu
-
Příklad metody stanovení enzymu
- stanovení aktivity α-amylázy ze slin: sestrojí se kalibrační přímka pro závislost absorbance na koncentraci maltózy (produkt štěpení škrobu amylázou), sliny se smíchají s fyziologickým roztokem a chloridem vápenatým, v termostatu se zředěné sliny přidají do roztoku škrobu s fosfátovým pufrem, reakce se nechá 15 minut, pak se část napipetuje do Somogyiho-Nelsonova činidla I,
- který reakci zastaví, za použití tohoto činidla (ještě II a III) se následně stanovuje absorbance oproti slepému vzorku, kde nebyly přidány sliny, za použití kalibrační přímky se zjistí koncentrace maltózy a
- následně se vypočítá aktivita amylázy
|
|
