-
3 drogi zwiększania masy żywej i objętości organizmu
- 1. synteza strukturalnych i funkcjonalnych składników materiału kom. - białka, nt, kw. nuk.
- 2. tworzenie nowych struktur i organelli -np. rybosomów, mitochondriów
- 3. wbudowywanie nowych fragmentów do struktur już istniejących
-
jaki parametr jest szeroko stosowany do pomiaru wzrostu drobnoustrojów, zarówno wielo-, jak i jednokomórkowych?
stężenie biomasy
-
jak, w przypadku c biomasy, wyrażany jest wzrost populacji?
szybkością zmian c suchej masy komórkowej: g/l x h
-
dlaczego przyrost suchej masy może być nierównoznaczny z namnażaniem drobnoustrojów?
bowiem biomasa może zawierać nie tylko składniki strukturalne i funkcjonalne warunkujące jej funkcje życiowe, m.in. wzrost, w komórkach są gromadzone również substancje zapasowe, a ich zawartość może dochodzić do 50% masy komórek
-
co jest najlepszym parametrem do oceny wzrostu replikacyjnego?
pomiar stężenia DNA
-
metody pomiaru wzrostu drobnoustrojów
- 1. przysrost świeżej (wilgotnej) masy komórkowej, która zawiera zazwyczaj 10 - 15 % suchej masy
- 2. przyrost V lub wysokości warstwy świeżej biomasy po odwirowaniu hodowli w wykalibrowanych probówkach
- 3. gęstość optyczna hodowli
- 4. pomiary liniowe - średnica kolonii, długość nitek grzybni
- 5. szybkość oddychania komórek
- 6. ilość wydzielanego ciepła
- 7. bioluminescencja
- + liczenie mikroskopowe
- filtry membranowe
- DEFP (direct epifluorescent filter technique, oranż akrylowy)
- liczenie automatyczne (licznik przepływowy, fluorescencyjny...)
- liczenie biologiczne – liczenie koloni (żywych komórek) – slide culture
- posiew redukcyjny
-
pomiary wzrostu populacji
- - szybkość zmian suchej masy komórkowej – g / l h
- (wszystkie komórki – żywe i martwe, + substancje zapasowe)
- sucha masa – suszenie do stałej wagi, 80 oC 24h; 110 oC /1h
-
pomiary zmiany świeżej masy
- PCV (Packed Cell Volume) – indeks objętościowy – sedymentacja w kalibrowanym leju
- turbidymetria, nefelometria (pomiar przy 420 lub 660 nm)
-
pomiar środowiska biomasy
- pomiar szybkości poboru tlenu
- oznaczanie produktów reakcji
- ilość wydzielanego ciepła
- zmiana przewodności
- bioluminescencja (lucyferaza /ATP)
-
pomiar składników biomasy
- analiza elementarna
- oznaczanie stężeń (białka, DNA), aktywności enzymów
|
|